Giải Bài ✅ (ĐÃ XÁC MINH)

Sự phát triển của các phương pháp tách chiết / ly trích DNA – Viện LOCI

Tách chiết / ly trích những phân tử sinh học ( DNA, RNA hay protein ) hoàn toàn có thể xem chiêu thức quan trọng được sử dụng trong sinh học phân tử. Nó là điểm khởi đầu cho những quá trình theo sau như chẩn đoán, định lượng, nghiên cứu và phân tích di truyền … DNA, RNA và protein hoàn toàn có thể được phân lập từ bất kể vật tư sinh học nào như những mô, tế bào, những thành phần virus sống hoặc đã qua dữ gìn và bảo vệ …

Để quy trình tách chiết / ly trích axit nucleic thành công xuất sắc yên cầu bốn bước quan trọng :– Phá vỡ hiệu suất cao những tế bào hoặc mô ;

– Biến tính của phức hợp nucleoprotein;

– Khử hoạt tính của nuclease, ví dụ, RNase để tách chiết RNA và DNase để tách chiết DNA ; tránh tạp nhiễm, ngoại nghiễm– Tinh sạch : Axit nucleic đích phải không có chất gây ô nhiễm, ức chế gồm có protein, carbohydrate, lipid hoặc axit nucleic khác, ví dụ : DNA không có RNA hoặc RNA không có DNA. Chất lượng và tính toàn vẹn của axit nucleic được tách chiết sẽ ảnh hưởng tác động trực tiếp đến hiệu quả của toàn bộ những quy trình theo sau .Mặt khác, quy trình ly trích RNA gặp 1 số ít khó khăn vất vả đáng kể. RNA là một phân tử không không thay đổi và có thời hạn bán hủy rất ngắn khi được chiết xuất từ tế bào hoặc mô. RNA đặc biệt quan trọng không không thay đổi do sự hiện hữu thông dụng của RNase là những enzyme có trong máu, toàn bộ những mô, cũng như hầu hết vi trùng và nấm trong môi trường tự nhiên. Tách chiết RNA cần dựa vào kỹ thuật phòng thí nghiệm tốt và không có sự hiện hữu của RNase. RNAse bền nhiệt và đông lại sau khi biến tính nhiệt. Chúng rất khó để bất hoạt vì chúng không nhu yếu những cofactor .

  1. Lịch sử phát triển

Kết tủa thô của DNA cô lập được lần tiên phong vào năm 1869 bởi Friedrich Miescher. Ban đầu, Miescher đã sử dụng những giải pháp sinh hóa để tách chiết / ly trích DNA – mà ông gọi là nuclein – từ những tế bào bạch cầu và tinh trùng, và xác lập rằng nó rất khác với protein ( thuật ngữ “ axit nucleic ” bắt nguồn từ “ nuclein. ” ) Để tách DNA khỏi những protein trong dịch chiết tế bào của mình, Miescher đã tăng trưởng quy trình tiến độ mới để tách nhân của tế bào khỏi tế bào chất và sau đó tách chiết DNA. Tuy nhiên, giao thức tiên phong của ông không mang lại đủ tài liệu để liên tục nghiên cứu và phân tích sâu hơn. Ông đã phải tăng trưởng một giao thức thứ hai để thu được số lượng lớn hơn nuclein tinh khiết, sau này được đặt tên là ‘ axit nucleic ’ bởi học trò của ông, Richard Altman .Sau sự kiện định mệnh nơi Miescher tìm cách lấy DNA từ tế bào, quy trình tiến độ tách chiết / ly trích và tinh sạch DNA theo dòng thời hạn từng bước được nâng cấp cải tiến, đổi khác theo hướng tách chiết / ly trích DNA từ nhiều đối tượng người dùng mẫu khác nhau, dựa trên những nguyên tắc khác nhau. Khi lựa chọn một giải pháp thích hợp để tách chiết / ly trích DNA, điều quan trọng là bảo vệ chất lượng và số lượng của DNA được phân lập để triển khai những ứng dụng theo sau dự kiến. Các yếu tố khác cần được xem xét để tối ưu hóa chiêu thức tách chiết DNA gồm có thời hạn, ngân sách, độc tính tiềm ẩn, hiệu suất, thiết bị phòng thí nghiệm và nhu yếu trình độ, cũng như lượng mẫu thiết yếu cho quá trình. Trong một thời hạn, những giải pháp tách chiết / ly trích khác nhau đã tăng trưởng ( Hình 1 ) .

Picture4

Hình 1 : Lịch trình của sự tăng trưởng của những kỹ thuật tách chiết DNA khác nhau

  1. Một số phương pháp ly trích DNA/RNA

Hiện nay, có nhiều giải pháp chuyên biệt để tách chiết DNA, RNA. Hầu hết những quá trình này đã được tăng trưởng thành những bộ kit ly trích thương mại giúp thuận tiện những quy trình tách chiết / ly trích phân tử sinh học .

  • Phương pháp tách chiết DNA dựa trên sắc ký

Phương pháp tách chiết DNA dựa trên sắc ký hoàn toàn có thể được sử dụng để phân lập DNA từ bất kể loại vật tư sinh học nào. Phương pháp này gồm có sắc ký dựa trên size ( size exclusion chromatography – SEC ), được ý tưởng bởi Lathe và Ruthven ( 1955 ), sắc ký trao đổi ion ( ion-exchange chromatography – IEC ) được tăng trưởng bởi Peterson và Sober ( 1956 ) và sắc ký ái lực ( affinity chromatography – AC ) được báo cáo giải trình bởi Cuatrecasas và Wilcheck. Trong sắc ký loại trừ kích cỡ ( SEC ), những phân tử được phân tách theo kích cỡ và hình dạng phân tử của chúng. Khi mẫu được cho vào ở phía trên và đi qua cột, những phân tử nhỏ hơn như mRNA và protein đi vào qua những lỗ nhỏ và kênh của những hạt, trong khi DNA bị loại khỏi việc xâm nhập vào những hạt và tránh khỏi chất nền với thể tích thủy động lực học lớn hơn của nó. Do đó, DNA được rửa giải khỏi cột nhanh hơn so với những phân tử nhỏ hơn. SEC thích hợp để sử dụng cho những chất nhạy cảm với sự biến hóa pH và nồng độ ion sắt kẽm kim loại .

  • Phương pháp ly tâm gradient EtBr-CsCl

Phương pháp này được tăng trưởng trở lại vào năm 1957 bởi Matthew Meselson, Franklin W. Stahl và Jerome Vinograd. Đầu tiên, DNA được trộn với clorua xêzi ( CsCl ), dung dịch này sau đó được siêu ly tâm ở vận tốc cao ( 10.000 đến 12.000 vòng / phút ) trong hơn 10 giờ. Quá trình này gọi là ly tâm isopycnic là một kỹ thuật nghiên cứu và phân tích tất cả chúng ta hoàn toàn có thể sử dụng để tách những thành phần của dung dịch tùy thuộc vào tỷ trọng, nhưng không nhờ vào vào size. Điều đó có nghĩa là, tất cả chúng ta hoàn toàn có thể tách những hạt trong dung dịch nếu chúng khác nhau về khối lượng riêng. Sau quy trình ly tâm, DNA tách khỏi phần còn lại của những chất dựa trên tỷ lệ của nó. Tùy thuộc vào những loại DNA đổi khác theo tỷ lệ, một hoặc nhiều dải DNA Open khi đạt đến điểm isopycnic ( điểm những thành phần có tỷ trọng khác nhau sẽ phân tách ). Ethidium bromide ( EtBr ) hoạt động giải trí như một tác nhân xen phủ và được phối hợp tương đối nhiều hơn vào những phân tử DNA không siêu cuộn hơn là siêu cuộn, do đó được cho phép DNA siêu cuộn tích tụ ở tỷ lệ thấp hơn. Vị trí của DNA hoàn toàn có thể thuận tiện nhìn thấy dưới ánh sáng cực tím. EtBr và CsCl được vô hiệu trước khi kết tủa DNA với ethanol. Phương pháp này hoàn toàn có thể được sử dụng để tách chiết / ly trích DNA từ vi trùng, nhưng cần một lượng lớn nguồn nguyên vật liệu. Hơn nữa, giải pháp này phức tạp, tốn thời hạn và ngân sách do thời hạn ly tâm siêu tốc độ cao lê dài .

  • Phương pháp ly giải kiềm (alkaline)

Phương pháp Alkaline được mô tả lần đầu tiên bởi Birnboim và Doly năm 1979. Phương pháp chuyên dùng để tách chiết / ly trích DNA plasmid từ vi khuẩn. Phương pháp ly trích này hiệu quả với tất cả các chủng E. coli và một số vi khuẩn với sự hiện diện của Sodium Dodecyl Sulfate (SDS)

Nguyên tắc : Sử dụng chất tẩy rửa có tính kiềm hóa như SDS – NaOH phá màng tế bào, giải phóng DNA. Trong điều kiện kèm theo thiên nhiên và môi trường kiềm, DNA bị biến tính trở thành dạng sợi đơn. Sau đó, kali axetat được bổ trợ làm giảm độ kiềm của hỗn hợp. Dưới những điều kiện kèm theo này, link hydro của những DNA chuỗi đơn hoàn toàn có thể được thiết lập lại, vì thế những DNA sợi đơn trở về dạng DNA sợi đôi. DNA plasmid tròn nhỏ nhanh gọn trở về dạng vòng đôi hơn so với DNA genome size lớn. Trong khi những plasmid sợi đôi hoàn toàn có thể hòa tan thuận tiện trong dung dịch, những sợi DNA đơn, SDS và những protein biến tính ở trạng thái kị nước tạo kết tủa trắng. Kết tủa hoàn toàn có thể thuận tiện tách ra khỏi dung dịch DNA plasmid bằng cách ly tâm .– Ưu điểm : hiệu suất cao trong tách chiết / ly trích plasmid, DNA ti thể. Kỹ thuật đơn thuần .– Nhược điểm : Môi trường kiềm nếu không được trung hòa tốt, tác động ảnh hưởng đến chất lượng DNA. DNA ly trích không dữ gìn và bảo vệ được lâu .

  • Ly trích bằng chất nền silica

Ái lực cao giữa silicat và DNA được Vogelstein và Gillespie diễn đạt lần tiên phong vào năm 1979. Kỹ thuật này dựa trên nguyên tắc link có tinh lọc của DNA tích điện âm với mặt phẳng silica được bao trùm bởi những ion tích điện dương. Với DNA link ngặt nghèo với chất nền silica, phần còn lại của chất gây ô nhiễm tế bào hoàn toàn có thể được rửa sạch trước khi DNA tách chiết được rửa giải khỏi những hạt silica bằng cách sử dụng nước cất hoặc dung dịch đệm như Tris-EDTA. Các giao thức sửa đổi khác nhau của kỹ thuật này đã được diễn đạt trong tài liệu, ví dụ điển hình như việc sử dụng chất nền silica ngậm nước để tách chiết / ly trích DNA .Phương pháp silica đơn thuần, triển khai nhanh, tiết kiệm ngân sách và chi phí ngân sách, thu được DNA chất lượng cao và hoàn toàn có thể được sử dụng để tự động hóa. Các bộ dụng cụ có sẵn trên thị trường tương quan đến việc sử dụng nền silica gồm có bộ tách chiết / ly trích DNA bộ gen Thermo Fisher Purelink và QIAGEN DNeasy Blood

  • Phương pháp salting-out

Phương pháp tách muối ( salting-out ) là một chiêu thức tách chiết DNA không ô nhiễm được Miller, Dykes và Polesky miêu tả vào năm 1988. Mẫu chứa DNA được thêm vào 3 mL dung dịch đệm ly giải ( 0,4 M NaCl, 10 mM Tris – HCl pH 8,0 và 2 mM EDTA, pH 8,0 ), SDS và proteinase K. Hỗn hợp được ủ ở 55 – 65 ° С qua đêm. Tiếp theo, khoảng chừng 6M NaCl bão hòa được thêm vào và lắc hỗn hợp trong 15 giây sau đó ly tâm ở 2500 vòng / phút trong 15 phút. Nồng độ muối cao làm giảm năng lực hòa tan của protein, dẫn đến kết tủa. Phần nổi phía trên có chứa DNA được dùng pipet hút vào một ống mới và hoàn toàn có thể được kết tủa bằng cách sử dụng ethanol .Phương pháp này đã được báo cáo giải trình là mang lại DNA chất lượng cao tương tự với chiêu thức phenol-cloroform, và ưu việt hơn ở hiệu suất cao về thời hạn và ngân sách và quan trọng nhất là thuốc thử được sử dụng không ô nhiễm. Nó cũng được sử dụng để tách chiết / ly trích DNA từ máu, nuôi cấy huyền phù hoặc mô giống hệt .

  • Phương pháp ly tríchCetyltrimethylammonium Bromide ( CTAB )

Quy trình ly trích tương thích cho mẫu thực vật và một số ít vi trùng gram âm. Cetyltrimethylammonium bromide ( CTAB ) là chất tẩy rửa không chứa ion hoàn toàn có thể kết tủa axit nucleic và polysaccharide. Đối với tách chiết / ly trích mẫu thực vật, bước tiên phong cần làm là nghiền mẫu sau khi ướp lạnh bằng nitơ lỏng. Mục đích của việc thực thi bước này là phá vỡ vật tư thành tế bào của mẫu và được cho phép tiếp cận axit nucleic trong khi những enzym và hóa chất có hại cho tế bào vẫn bị bất hoạt. Sau khi nghiền mẫu 1 số ít phòng điều tra và nghiên cứu liên tục tiến trình phá mẫu bằng việc ủ với dung dịch ly giải tế bào .

Tiếp theo là bước tạo phức với CTAB. CTAB có khả năng liên kết thuận nghịch với ADN và polysaccharide, cụ thể ở nồng độ muối cao (trên 1.4 M NaCl có trong đệm chiết) thì CTAB kết hợp với ADN và polysaccharide nhưng phức hợp CTAB-DNA tồn tại ở trạng thái hòa tan, trong khi đó phức CTAB-polysaccharide lại kết tủa. Sau đó, DNA được tinh chế bằng cách sử dụng các dung môi hữu cơ và rượu khác nhau, bao gồm các tác nhân độc hại như phenol và chloroform. Những hạn chế chính của phương pháp này bao gồm việc sử dụng các thuốc thử độc hại và quy trình tốn thời gian.

Tham khảo tài liệu đính kèm

  • Phương pháp Phenol – chloroform

Năm 1953, Grassmann và Deffner phát hiện rằng phenol là chất thích hợp để chiết xuất protein từ dung dịch nước. Kirby ( 1956 ), báo cáo giải trình phenol ở những điều kiện kèm theo pH khác nhau được cho phép phân tách DNA và RNA ra khỏi protein. Ngay sau đó, 1957, Kirby tìm thấy rằng sự xuất hiện của muối anion ( ví dụ p-aminosalicylate và natri benzoate ) giúp tăng lượng DNA và RNA trong quy trình tách chiết / ly trích. Ngày nay, chiêu thức Kirby liên tục được sử dụng với sự bổ trợ một số ít chất tương hỗ khác như chất tẩy rửa anion SDS, chloroform và isoamyl alcohol. Phương pháp tách chiết / ly trích DNA bằng phenol-chloroform được trình làng vào năm 1998 bởi Barker và tập sự .Tách chiết / ly trích bằng phenol là giải pháp ly trích sinh ra sớm nhất, vẫn được sử dụng trong những phòng thí nghiệm và được xem là chiêu thức ly trích cơ bản thích hợp cho nhiều đối tượng người dùng mẫu .Nguyên tắc : Phenol là chất biến tính protein mạnh đóng vai trò hủy hoại những protein màng, enzyme phân hủy DNA, RNA. Phenol không hòa tan acid nucleic, khi giải quyết và xử lý với hóa chất này, tế bào sẽ bị phá vỡ và giải phóng những thành phần nội bào : DNA, RNA, protein … Sau khi ly tâm, mẫu giải quyết và xử lý sẽ phân tách thành hai lớp : Lớp dưới là phenol, lớp trên là nước chứa DNAvà RNA, phần protein bị biến tính sẽ nằm ở mặt phẳng phân làn hai lớp này và bị vô hiệu. DNA trong phần dịch nổi ở trên sẽ được tách chiết bằng cách tủa với isopropanol có bổ trợ chất trợ tủa ( sodium acetat ). Muối dư thừa được rửa sạch với ethanol 70 %. Ly tâm, hong khô bằng nhiệt để vô hiệu ethanol. Sau đó DNA được hòa tan với đệm TE hoặc nước cất vô trùng .

Việc sử dụng guanidinium isothiocyanate trong chiết xuất RNA lần đầu tiên được đề cập bởi Ulrich et al. (Năm 1977). Phương pháp này tốn nhiều công sức. Do đó, nó đã được thay thế bằng kỹ thuật một bước, được gọi là tách chiết / ly trích Guanidinium thiocyanate-phenol-chloroform, bởi Chomczynski và Sacchi (1987– Tham khảo tài liệu đính kèm). Nguyên tắc của kỹ thuật một bước này là RNA được tách khỏi DNA sau khi chiết xuất bằng dung dịch axit bao gồm guanidinium thiocyanat, natri axetat, phenol và chloroform. Trong điều kiện axit, RNA tổng số sẽ vẫn ở trong pha nước phía trên của toàn bộ hỗn hợp, trong khi DNA và protein vẫn ở trong pha giữa hoặc pha hữu cơ thấp hơn. Việc thu hồi RNA tổng số sau đó được thực hiện bằng cách kết tủa với isopropanol.

Phương pháp phenol-cloroform là tiêu chuẩn vàng cho tách chiết / ly trích DNA. Nó hoàn toàn có thể được sử dụng để tách chiết DNA từ máu, nuôi cấy huyền phù hoặc giống hệt mô. Nó cung ứng hiệu suất cao và tương đối rẻ. Tuy nhiên, thực chất ô nhiễm của phenol và cloroform yên cầu phải sử dụng tủ hút và là hạn chế lớn của chiêu thức này. Các mẫu DNA tách chiết có độ tinh khiết cao hơn so với những chiêu thức thường thì nhưng thấp hơn so với những mẫu thu được bằng giải pháp cột. Một ví dụ về bộ dụng cụ có sẵn trên thị trường dựa trên chiêu thức này là Thermo Fisher Easy-DNA ®

  • SDS-Proteinase K

Proteinase K là một protease serine lần đầu tiên được phát hiện bởi Ebeling và cộng sự trong nấm album Engyodontium năm 1974. Để tách chiết DNA, thường thêm 20–50 µL 10–20 mg / mL proteinase K. Natri dodecyl sulfat (SDS) cũng được thêm vào để hòa tan màng tế bào và vỏ nhân cũng như làm biến tính và mở ra các protein, cho chúng tiếp xúc với hoạt tính protease của proteinase K. Dung dịch sau khi ủ với SDS – Proteinase K ở 50–60 ° С có thể được sử dụng để tách chiết / ly trích DNA bằng phương pháp phenol-chloroform hoặc salting-out với hiệu suất ly trích tốt hơn.

  • Phương pháp magnetic bead

Magnetic bead là những hạt từ tính được tạo thành từ những hạt ôxít sắt cực nhỏ ( 20 đến 30 nm ), ví dụ điển hình như magnetit ( Fe3O4 ), mang lại cho chúng đặc tính siêu thuận từ ( là đặc tính được cho phép những hạt được tách ra ở dạng huyền phù, cùng với bất kể thứ gì chúng bị ràng buộc. Vì chúng không hút nhau bên ngoài từ trường, chúng hoàn toàn có thể được sử dụng mà không cần lo ngại về sự kết tụ không mong ước ) .Năm 1998, Trevor Hawkins đã nộp văn bằng bản quyền trí tuệ có tiêu đề “ Tinh chế và tách chiết DNA bằng cách sử dụng những hạt từ tính ”. Các hạt nano từ tính phủ kháng thể link DNA hoặc polyme có ái lực đơn cử với DNA hoàn toàn có thể được sử dụng để link DNA với mặt phẳng của nó. Cách tiếp cận, phần đông không biến hóa kể từ đó, dựa vào việc sử dụng những hạt từ tính với lớp phủ hoàn toàn có thể link những axit nucleic một cách thuận nghịch chỉ bằng cách kiểm soát và điều chỉnh những điều kiện kèm theo đệm ( Hình 2 ). Tùy vào lớp phủ, hạt từ kết nối vào những đối tượng người dùng đích khác nhau ( DNA, RNA, Protein, những phân tử miễn dịch … )Hiệu suất DNA thu được bằng chiêu thức này hoàn toàn có thể so sánh với sản lượng thu được trong những giải pháp tách chiết / ly trích thường thì khác và quy trình tiến độ này đã được chứng tỏ là mất ít hơn 15 phút để triển khai xong, nhanh hơn nhiều so với những chiêu thức thường thì khác hoàn toàn có thể mất đến vài giờ. Hơn nữa, nó lý tưởng cho việc tự động hóa và cần ít thiết bị để triển khai vì nó không phụ thuộc vào vào quy trình ly tâm. Một ưu điểm khác so với những chiêu thức tách chiết / ly trích dựa trên ly tâm là kỹ thuật này không tương quan đến việc sử dụng lực cắt hoàn toàn có thể làm hỏng tính toàn vẹn của axit nucleic. Tuy nhiên, giao thức này không hiệu suất cao về ngân sách so với những giải pháp khác .

Picture2

Hình 2 : Tổng quan về tách chiết / ly trích DNA dựa trên hạt từ tính bằng cách sử dụng hạt Sera-Mag .https://www.cytivalifesciences.com/en/us/news-center/magnetic-beads-a-simple-guide-10001

  • Cellulose-based paper

Cellulose là một polyme được hydroxyl hóa có ái lực link cao với DNA. Năm 2000, Whatman, Inc. đã nộp bằng bản quyền sáng tạo có tiêu đề “ Sử dụng Ftacoated truyền thông như một công cụ chẩn đoán phân tử ”. Thẻ Whatman ™ FTA ™ là một ví dụ về giấy làm từ cellulose có bán trên thị trường được sử dụng thoáng đãng để tách chiết / ly trích DNA. Chúng được ngâm tẩm với chất đệm, chất tẩy rửa và chất tạo chelat để tạo điều kiện kèm theo cho việc tách chiết DNA .Việc tách chiết DNA bằng giấy làm từ cellulose nhanh gọn, thuận tiện cao, không nhu yếu trình độ sâu trong phòng thí nghiệm và được cho phép thuận tiện dữ gìn và bảo vệ mẫu mà không cần làm lạnh. Tuy nhiên, quy trình giải quyết và xử lý hạ nguồn để tịch thu DNA tinh khiết và cô đặc hoàn toàn có thể rất khó khăn vất vả

  • Ly trích Chelex-100

Năm 2011, Xiong Hui, Xie Liqun và Chen Jiayi đã được cấp bằng bản quyền sáng tạo cho chiêu thức tách chiết / ly trích DNA bằng cách sử dụng chelex-100. Cột chelex là một chất đồng trùng hợp styrenedivinylbenzen được sử dụng để chelate những ion sắt kẽm kim loại hoạt động giải trí như cofactor cho DNase với những nhóm axit iminodiacetic của nó. Sau khi ủ qua đêm, dung dịch chelex 5 % và proteinase K được sử dụng để phân hủy DNase được thêm vào. Sau đó, mẫu mô được đun sôi trong dung dịch chelex 5 % để làm khô những màng còn lại cũng như làm biến tính những protein và DNA. Chelex ngăn không cho DNA bị tiêu hóa bởi những DNase hoàn toàn có thể vẫn còn sau khi đun sôi, do đó không thay đổi quy trình sẵn sàng chuẩn bị. Sau đó, DNA sợi đơn thu được hoàn toàn có thể được cô đặc khỏi dịch nổi sau khi ly tâm. Ưu điểm của giải pháp này gồm có giảm rủi ro tiềm ẩn nhiễm bẩn và những sai sót kỹ thuật vì tiến trình chỉ sử dụng một ống nghiệm duy nhất và một vài bước thao tác. Tuy nhiên, việc thiếu quy trình tinh sạch làm cho giải pháp này không hiệu suất cao trong việc vô hiệu những chất ức chế PCR. Một hạn chế khác là DNA được tách chiết / ly trích hoàn toàn có thể không không thay đổi và không thích hợp cho nghiên cứu và phân tích RFLP .

  • Tách chiết / ly trích DNA bằng giấy lọc

Vào năm 2017, Rui Shi và Dilip Panthee miêu tả một chiêu thức tách chiết DNA bằng cách sử dụng giấy lọc, hoàn toàn có thể được sử dụng để phân lập DNA từ những nguồn thực vật. Một đĩa quay gồm có một đĩa 96 giếng ( đáy chữ V ) với một lỗ ( đường kính khoảng chừng 1 mm ) được khoan vào đáy của mỗi giếng được sử dụng, với mỗi giếng chứa một đĩa giấy lọc Whatman ™ ( khoảng chừng 8 mm đường kính ). Các mẫu được giải quyết và xử lý bằng đệm ly giải được lọc bằng ly tâm. Phương pháp này sửa chữa thay thế những bộ lọc sợi thủy tinh được sử dụng trong những bộ dụng cụ thương mại để tách chiết DNA bằng giấy lọc, do đó làm giảm đáng kể ngân sách của giải pháp này

  1. Tổng kết

Kể từ lần tách chiết / ly trích DNA tiên phong do Friedrich Miescher thực thi vào năm 1869, những nhà khoa học đã đạt được văn minh khác thường trong việc phong cách thiết kế những giải pháp tách chiết đáng an toàn và đáng tin cậy hơn, thuận tiện hơn và triển khai nhanh hơn, tiết kiệm chi phí ngân sách hơn và tạo ra hiệu suất cao hơn. Các kỹ thuật mới hơn đáng đáng tin cậy và hiệu suất cao hơn đã tạo điều kiện kèm theo thuận tiện cho sự văn minh trong kiến thức và kỹ năng về bộ gen người và đóng một vai trò quan trọng trong sự sinh ra của nhiều nghành khác nhau trong khoa học như chỉnh sửa gen và y học cá thể hóa. Tuy nhiên, hiện tại có vẻ như không có quá trình duy nhất nào hoàn toàn có thể vận dụng cho tổng thể những toàn cảnh tách chiết / ly trích DNA do những hạn chế của chúng trong việc tạo ra sản lượng với độ tinh khiết tối ưu và sự tiện nghi khi sử dụng. Do đó, cần có những giải pháp để khắc phục những hạn chế của những kỹ thuật này để có tác dụng tốt hơn và đơn giản hóa việc giải quyết và xử lý DNA. Sự nâng cấp cải tiến trong phong cách thiết kế những giải pháp tách chiết / ly trích hiện có và tăng trưởng những kỹ thuật mới sẽ là động lực để xu thế sự tăng trưởng hơn nữa của công nghệ tiên tiến tách chiết DNA trong tương lai .Tài Liệu tìm hiểu thêm :The Evolution of DNA Extraction Methods

DNA, RNA, and Protein Extraction The Past and The Present

The single-step method of RNA isolation by Guanidinium thiocyanate-phenol-chloroformpp CTAB

VIETLIKE.VN

CEO: Công ty TNHH Công Nghệ Truyền Thông Ez Media.

Trả lời

Email của bạn sẽ không được hiển thị công khai.

Back to top button